【单选题】原核生物识别转录起始点的是A. ρ 因子B. 核心酶C. RNA 聚合酶的 α 亚基D. σ 因子E. dnaB 蛋白

圆叶目绦虫卵与假叶目绦虫卵之间的重要区别点就是前者有卵盖,后者无卵盖。A. 对B. 错

25.（12分）CRISPR/CAS9基因组编辑技术源于细菌抵御噬菌体的机理研究。细菌被特定噬菌体感染后，细菌Cas2会随机切断人侵的嗞菌体DNA双链，并将切下的一个DNA片段（原型间隔序列）插入CRISPR位点（由间隔序列和重复序列交替排列组成的基因序列）的重复序列中，构成新的间隔序列，形成“免疫记忆”。当同种噬菌体再次入侵时，由CRISPR位点的新的间隔序列转录产生的crRNA便会将另一种蛋白质（如Cas9）准确带入到入侵者的原间隔序列DNA处，并将之切断，即“免疫灭杀”。CRISPR/Cas9基因编辑技术中sgRNA（单向导RNA）是根据靶基因设计的引导RNA，准确引导Cas9切割与sgRNA配对的靶基因DNA序列CRISPR/Cas9系统进行基因编辑时，对DNA序列中的原型间隔序列相邻基序具有较高的编辑效率，如图所示。回答下列问题:原型间隔序列 PAM-|||-5` Cas9 3`-|||-3` 5`-|||-xi60-|||-5 II-|||-引导序列,20nt-|||-sgRNA bigcirc -|||-3（1）细菌Cas2基因表达Cas2的过程需要细菌提供_____________________等原料，Cas2和Cas9在功能上都属于_______________酶，可催化_________________（化学键）水解。（2）CRISPR/Cas9系统中的sgRNA与细菌体内的_____________功能相同，都可以与相应靶基因序列发生碱基互补配对。细菌利用该防御机制可以有效抵抗噬菌体的二次入侵，但是仍然会有部分噬菌体能够继续侵染已经获得免疫能力的宿主菌，原因可能是:___________（3）CR1SPR/Cas9基因编辑技术存在一定的脱靶效应：正常情况下，sgRNA通过20个核苷酸长度的引导序列与目标DNA序列发生碱基互补配对准确识别需要编辑的位点，然而有时会发生第18-20个碱基不匹配的情况，此时，Cas9可通过一个手指状的结构紧紧抓住错配区稳定住RNA-DNA双链，从而为Cas9切割DNA铺平道路，但这可能会导致Cas9在错误的基因位点切割双链DNA，从而引发潜在风险。请就如何降低脱靶效应，提出可能的思路:________________________（4）研究证实，人低氧诱导因子（HIF-1α）表达水平与肝癌的发生发展具有密切关系，HIF-1α在肝癌细胞中的表达水平明显高于正常肝细胞，使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除HIF-1α基因为肝癌治疗提供了新途径。科研人员构建了靶向HIF-1α基因的CRISPR/Cas9重组质粒，并用重组质粒对肝癌细胞进行转染，利用其敲除肝癌细胞中的HIF-1α基因，并通过12孔板错选获得了基因敲除的混合克隆细胞株，然后用HIF-1α表达诱导剂（CoCl2）诱导相关细胞，提取蛋白，用Westernblot法（分离检测蛋白质的一种方法）检测HIF-1α蛋白的表达，以相应条带灰度值（越大）表示表达水平（越高）。下图为三类细胞HIF-1α蛋白的检测结果:原型间隔序列 PAM-|||-5` Cas9 3`-|||-3` 5`-|||-xi60-|||-5 II-|||-引导序列,20nt-|||-sgRNA bigcirc -|||-3请尝试分析图示实验结果及结论:____________________________

以下可以作为外植体的材料有:A. 细胞B. 组织C. 器官D. 原生质体E. 胚胎

双着丝粒畸变是电离辐射引起的标志性染色体畸变类型。-|||-A 正确-|||-B 错误

可从带绦虫成虫末端自行脱落的节片是()A. 头节B. 颈部C. 幼节D. 成节E. 孕节

75. (1.0分) 机械法获得的原生质体数量很少。A 对B 错

回答下列有关生物工程的问题．Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图1（图中数字序号表示的是相关过程）．分离、培养-|||-上皮细胞-|||-Rag2基因 ① ②-|||-缺失小鼠 核移植 培养-|||-重组胚胎-|||-移植 ES细胞-|||-卵母细胞 分离、培养-|||-8 体外 8基因导入-|||-诱导 8-|||-造血干细胞 ES细胞 ES细胞 图1分离、培养-|||-上皮细胞-|||-Rag2基因 ① ②-|||-缺失小鼠 核移植 培养-|||-重组胚胎-|||-移植 ES细胞-|||-卵母细胞 分离、培养-|||-8 体外 8基因导入-|||-诱导 8-|||-造血干细胞 ES细胞 ES细胞 图2 （1）在核移植前应去除 ____ 的细胞核．（2）过程②，重组胚胎培养到一定时期时，可从其 ____ 中分离出的ES细胞的特点是 ____ ．（3）过程③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体，具体过程如图2．图中Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同．可以根据Rag2基因的 ____ 设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，④过程采用的酶是 ____ ，⑤过程采用的酶是 ____ ．如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同时对质粒进行切割，假设同时只有任意两个位点被切断且每次机会相等，则形成的DNA片段有 ____ 种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占 ____ ．（4）在ES细胞培养液中加入 ____ 可以体外诱导定向形成造血干细胞．（5）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的 ____ ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．

65.牛带绦虫成虫比猪带绦虫成虫长，故它的危害性也比猪带绦虫大。A. 正确B. 错误

内皮细胞质中有一些质膜小泡（吞饮小泡）结构。关于它以下描述错误的是A. 可与基底面细胞膜融合B. 可与游离面细胞膜融合C. 转运物质D. 可以作为膜储备E. 与穿细胞的通道无关